Влияние пробиотических бактерий in vitro на патогены половых органов у самок собак | Ветеринарные исследования BMC | Полный текст

BMC Veterinary Research, том 19, номер статьи: 82 (2023) Ссылка на эту статью

2639 доступов

3 цитаты

1 Альтметрика

Подробные данные по метрикам

Важным аспектом микробиологии репродуктивной системы мелких животных является потенциальное наличие пробиотических бактерий, таких как молочнокислые бактерии (МКБ) рода Lactobacillus. Наличие этих микроорганизмов имеет важное значение благодаря их сильным антибактериальным и противогрибковым свойствам. Целью данного исследования был отбор пробиотических штаммов из ротовой полости и влагалища, обладающих выраженными антибактериальными свойствами в отношении типичных патогенов половых органов самок собак.

Антагонистическая активность десяти штаммов молочнокислых бактерий (МКБ) была исследована в отношении семи этиологических агентов, выделенных из половых путей самок собак с признаками воспаления. Наибольшей способностью ингибировать рост индикаторных бактерий обладали Lactobacillus plantarum и L. acidophilus, наименьшей – L. fermentum и L. brevis. Практически все штаммы полностью не связывались с эпителиальными клетками Caco-2.

Все исследованные изоляты молочнокислых бактерий ингибировали рост in vitro как грамположительных, так и грамотрицательных патогенов, что позволяет предположить, что потенциальные пробиотические штаммы могут способствовать поддержанию баланса нормальной вагинальной микробиоты. Более того, их можно рассматривать в качестве профилактических средств или альтернативы антибиотикотерапии инфекций у собак.

Отчеты рецензирования

Многочисленные исследования, определяющие вагинальную микрофлору у собак, не рассматривают штаммы рода Lactobacillus spp., при этом Хатчинс и др. [1] сообщают об отсутствии этой популяции в микробиоте, что коррелирует с результатами нашего исследования [2]. Действительно, эти штаммы не обнаруживаются во влагалищной среде из-за типично высокого pH от 6,5 до 7,5 [2, 3]. Для сравнения, pH во влагалище женщины человека составляет 4,5 или ниже [3], и молочнокислые бактерии растут в диапазоне от 4,5 до 7,0, с оптимумом роста при pH 6,0, в то время как виды, такие как L. plantarum, растут при pH в диапазоне от 4,0 до 8,0 [4]. Тем не менее, первые сообщения об изоляции Lactobacillus spp. от самок собак появились в 2008 году [3].

Пробиотики определяются Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) как живые микроорганизмы, которые оказывают благотворное влияние на здоровье хозяина при применении в адекватных количествах (Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций и Рабочая группа ВОЗ, 2002). Пробиотические бактерии включают, среди прочего, три типа молочнокислых бактерий (МКБ) из родов Lactobacillus, Bacillus и Bifidobacterium, которые колонизируют полость рта, пищеварительный тракт и влагалище большинства млекопитающих. Антибактериальный потенциал МКБ обусловлен продукцией молочной кислоты, что приводит к закислению среды и образованию бактериоцинов и перекиси водорода [1]. Эффективный пробиотик характеризуется его потенциалом для колонизации хозяина, его способностью препятствовать колонизации патогенами и его адгезией к эпителиальным клеткам. При этом эти штаммы не должны обладать патогенным потенциалом и должны быть устойчивы к желудочному соку и желчным солям [3, 5].

Исследования, проведённые на молочнокислых бактериях самок, показали, что они регулируют микрофлору урогенитального тракта и обладают антагонистическими свойствами по отношению к патогенным бактериям. Поскольку штаммы лактобацилл являются физиологическим компонентом женских половых путей, в данном исследовании была предпринята попытка выделить пробиотические бактерии из вагинального тракта собак.

Первое исследование пробиотических бактерий в половых путях здоровых самок собак было проведено Делукки и соавторами [3], которые продемонстрировали наличие молочнокислых бактерий во влагалище, причем Lactobacillus были выделены в 59% случаев (из 42 обследованных собак). Выделенные штаммы ингибировали рост in vitro патогенных бактерий, включая Escherichia coli, Proteus mirabilis и Staphylococcus aureus, что позволяет предположить, что молочнокислые бактерии играют полезную и защитную роль при инфекциях урогенитального тракта у самок. Хотя описанные выше исследования показывают, что молочнокислые бактерии могут быть компонентом вагинальной микрофлоры, их способность адгезироваться к вагинальному эпителию не была продемонстрирована. Наиболее распространенные вагинальные бактерии у собак происходят от видов Lactobacillus и Enterococcus [3, 6], при этом L. gasseri, L. brevis и L. acidophilus демонстрируют отличную адгезию к вагинальным эпителиальным клеткам [7,8,9]. Однако у собак они не обладают такими эффективными свойствами.

Целью данного исследования был отбор пробиотических штаммов бактерий, выделенных из полости рта и влагалища, которые обладают выраженными антибактериальными свойствами в отношении типичных генитальных патогенов репродуктивного тракта самок собак.

Собаки, принадлежащие клиентам, были доставлены в ветеринарную клинику Университетского центра ветеринарной медицины Ягеллонского университета и Краковского сельскохозяйственного университета (JU-AU), Польша, в связи с репродуктивными проблемами, мониторингом эструса, определением даты вязки или плановым гинекологическим осмотром племенных собак. Владельцы были проинформированы о цели исследования и дали письменное согласие на участие своих собак в исследовании.

Отбор проб для микробиологического исследования, цитологических мазков, определения уровня сывороточного прогестерона и стратификации клинических групп проводился, как описано ранее [2]. Образцы для микробиологического исследования брали из дорсальной части верхнего свода влагалища стерильным тампоном и стерильным влагалищным зеркалом Hannover (Eickemeyer, Туттлинген, Германия) длиной 150 мм и диаметром 5, 10 или 15 мм (размер подбирался индивидуально для суки). Кроме того, образцы из ротовой полости брали стерильным тампоном. Все микробиологические образцы доставляли в лабораторию в транспортной среде Amies (Deltalab, Барселона, Испания) в течение четырёх часов после сбора.

Тампон переносили из транспортной среды в 1 мл бульона Шедлера (Becton, Dickinson and Company, Мэриленд, США) и встряхивали в течение 1 мин [2]. Затем готовили серийные десятичные разведения в том же бульоне и высевали аликвоты по 100 мкл на стандартные среды для культивирования, включая агар Макконки (Oxoid Ltd, Хэмпшир, Великобритания) для энтеробактерий, колумбийский кровяной агар с 5% овечьей крови (Oxoid) для стрептококков, агар с желчно-эскулиновым азидом (BBL™) Enterococcosel™ (Beckton Dickinson, Нью-Джерси, США) для энтерококков, агар Рогоза (Merck, Дармштадт, Германия) для лактобацилл и агар Саборо (Merck) для грибов рода Candida. Затем разведения распределяли по поверхности пластины стеклянной палочкой, и пластины инкубировали при 35 °C в течение 24 ч (для аэробных бактерий) или 48 ч в микроаэрофильных условиях (для лактобацилл) [2]. Морфологию выросших колоний оценивали с помощью увеличительного стекла, и несколько образцов колоний каждого морфологического типа пересевали на соответствующие среды и окрашивали по Граму. После пересева все колонии, представляющие различные морфотипы, подсчитывали на пластинах с соответствующей плотностью колоний. Количество бактерий выражали в виде логарифма 10 колониеобразующих единиц на 1 мл (КОЕ/мл) [2]. Пересеянные колонии далее инкубировали, и после проверки чистоты культур проводили фенотипическую идентификацию с использованием коммерческих систем идентификации: индекса аналитического профиля (API) 20E, API50CH, APIStaph, APIStrep и API20NE (bioMerieux, l'Etoile, Франция).

В случае неубедительных результатов тестов на АФИ проводилась полимеразная цепная реакция (ПЦР) с видоспецифичными праймерами Llac-f 5'-GGCGGCTTACTGGACAAC-3' и Llac-r 5'-CTTAGACGGCTCCTTCCAT-3' для L. lactis и LcR-F 5'-CGTTGCATAGAGTGGAAAATTATG-3' и Lc-R 5'-GTTGAGCCACTGCCTTTTAC-3' для L. rafinolactis. Амплификацию проводили по методологии, описанной Ли и Одамаки [10, 11].

Индикаторными бактериями служили бактерии, выделенные от самок собак в возрасте от шести месяцев до десяти лет (из наших предыдущих публикаций) [2] с типичными признаками воспаления половых путей (слизистые, молочно-белые, зеленоватые или желтоватые выделения из влагалища, при цитологическом исследовании эпителия влагалища обнаруживалось большое количество нейтрофилов, тяжей слизи и фрагментов эпителиальных клеток). Эти бактерии были использованы в экспериментах по оценке антибактериальной активности молочнокислых бактерий.

Бактерии родов Lactobacillus, Leuconostoc и Lactococcus (n = 10) были выделены из ротовой полости четырёхлетних самок собак (n = 5). Эти бактерии были подвергнуты испытаниям in vitro для определения их возможных пробиотических свойств, уделяя особое внимание их антагонистическим свойствам по отношению к индикаторным бактериям и адгезии к эпителиальным клеткам кишечника.

Метод пластинчатого агара используется для полуколичественной оценки активности пробиотических бактерий в популяции индикаторных бактерий. Антагонистическая активность десяти штаммов молочнокислых бактерий была исследована против семи выбранных этиологических агентов, выделенных из половых путей самок собак с признаками воспаления, с использованием метода пластинчатого агара, разработанного Штрусом и соавторами [12, 13]. Суспензию штаммов Lactobacillus с плотностью 2 по шкале Макфарланда (согласно стандартам Макфарланда) высевали на среду MRS (де Мана, Рогозы и Шарпа) и инкубировали при температуре 37°C в течение 48 ч в анаэробных условиях. Затем из плотной среды с помощью стерильного пробкового сверла вырезали диски диаметром 9 мм и помещали на соответствующую агаризованную среду, содержащую штаммы тестируемых патогенов с плотностью 0,5 по шкале Макфарланда. Дальнейшее культивирование проводили в аэробных условиях при температуре 37˚С в течение 24 ч. Затем измеряли диаметр зоны задержки роста вокруг пластин агара, содержащих пробиотические штаммы.

Количественный метод позволил более точно наблюдать кинетику взаимодействия штаммов молочнокислых бактерий с патогенной бактериальной популяцией. Штаммы молочнокислых бактерий размножали в жидкой среде MRS в анаэробных условиях при 37 °C в течение 72 ч, достигая плотности приблизительно 5 × 107 КОЕ/мл. Индикаторные бактерии суспендировали в стерильном физиологическом растворе до концентрации приблизительно 1 × 108 КОЕ/мл. Каждый культивируемый пробиотический штамм помещали в стерильную пробирку (900 мкл), и к каждой добавляли суспензию индикаторных бактерий (100 мкл). Смеси пробиотиков и индикаторных бактерий высевали в разведениях через 0,8 и 24 ч и инкубировали при 37 °C в аэробных условиях в течение 24 ч. Все индикаторные колонии подсчитывали на чашках Петри с достаточной плотностью колоний.

Способность штаммов лактобацилл адгезироваться к эпителию кишечника оценивали in vitro с использованием линии эпителиальных клеток карциномы толстой кишки человека Caco-2 (Американская коллекция типовых культур, Мидлсекс, Великобритания). Эта линия клеток является наиболее хорошо описанной и охарактеризованной линией кишечных клеток, представляющей кишечную линию млекопитающих.

Клетки выращивали до слияния в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM)/F-12 (GIBCO, Калифорния, США), дополненной 10% инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) (GIBCO), на полупроницаемых вставках для тканевых культур Transwell™ размером 0,4 мкм (Corning, Нью-Йорк, США) в увлажненном инкубаторе при температуре 37 °C и 5% CO2. Вкратце, 48-часовые культуры клеток Caco-2 при плотности 1 × 106 клеток/мл инкубировали в течение 24 часов в 12-луночных планшетах для культивирования тканей с плоским дном (Иваки, Фукусима, Япония) в среде Игла 1959 (MEM) (Биомед, Люблин, Польша), содержащей L-глутамин, бикарбонат натрия (NaHCO3) (IITD, Вроцлав, Польша), 5% эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma-Aldrich Chemie, Германия) и антибиотики (пенициллин 100 МЕ/мл, стрептомицин 100 МЕ/мл, неомицин 200 мкг/мл) (Sigma Aldrich, Chemie, Германия), затем дважды промывали фосфатным буферным физиологическим раствором (PBS).

Ночные культуры бактерий разбавляли MRS и MEM до концентрации приблизительно 108 КОЕ/мл и использовали для инокуляции клеток в планшетах. После инкубации при 37 °C в течение 30 минут лунки дважды промывали PBS для удаления несвязавшихся бактерий. Затем клетки фиксировали 3,7% формальдегидом в течение одного часа, дважды промывали PBS и окрашивали кристаллическим фиолетовым (Merck, Дармштадт, Германия). Количество адгезированных бактериальных клеток подсчитывали в пяти случайно выбранных полях зрения микроскопа, а степень адгезии оценивали с помощью полуколичественной системы оценки от 0 до 3 на основе следующих характеристик:

сильная адгезия (3): > 80 бактериальных клеток на поле

умеренная адгезия (2): 61–80 бактериальных клеток на поле зрения

слабая адгезия (1): 41–60 бактериальных клеток на поле зрения

нет адгезии (0): < 40 бактериальных клеток на поле

Все эксперименты проводились дважды.

Статистическую значимость различий в антагонистических свойствах штаммов молочнокислых бактерий анализировали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA). Уровень значимости был установлен на уровне P < 0,05.

В данном исследовании в качестве индикаторов были использованы семь штаммов патогенных бактерий, вызывающих воспаление репродуктивного тракта собак, основанные на предыдущей работе Голинской и соавторов [2]. Штаммы относятся к пяти видам: E. coli (два штамма), Staphylococcus intermedius (два штамма), Klebsiella pneumoniae, Enterococcus faecalis и Streptococcus canis (таблица 1).

Штаммы молочнокислых бактерий, выделенные из всех исследованных образцов, полученных из ротовой полости собак, включали десять штаммов, принадлежащих восьми видам: Lactobacillus acidophilus (два штамма), Lactobacillus fermentum (два штамма), Lactobacillus plantarum, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus brevis, Lactococcus raffinolactis и Leuconostoc lactis (таблица 2). В вагинальных мазках молочнокислые бактерии не обнаружены.

Антагонистическая активность десяти штаммов молочнокислых бактерий была протестирована против семи выбранных этиологических агентов, выделенных из половых путей собак с признаками воспаления, и результаты представлены на рис. 1 и в таблице 3. Диаметр зон задержки роста тестовых бактерий, вызванных молочнокислыми бактериями, варьировался от 9 до 21 мм, а диаметр пластины составил 9 мм. В целом, наибольшее ингибирование наблюдалось для E. coli P37 и S. canis P37, тогда как наименьшее было обнаружено для S. pseudintermedius P40 и S. pseudintermedius P41. Штаммами молочнокислых бактерий, проявившими наибольшую способность ингибировать рост индикаторных бактерий, были L. plantarum и L. acidophilus. При этом наименьшее ингибирование роста было вызвано штаммами L. fermentum и L. brevis.

Пример фотографии из полуколичественного исследования антагонистических способностей отдельных штаммов с пробиотическими свойствами против Escherichia coli

Для изучения антагонизма количественным методом были отобраны пять штаммов молочнокислых бактерий, вызывавших наибольшее ингибирование роста индикаторных бактерий в полуколичественном исследовании: L.plantarum/1, L. acidophilus/3, L.acidophilus/6, Leuconostoc lactis/9 и Lactococcus raffinolactis/8.

Наибольшую антагонистическую активность проявил L. plantarum/1, который снизил концентрацию K. pneumoniae и S. canis со 107 КОЕ/мл до 101 КОЕ/мл в течение восьми часов, а также штаммов E. coli и S. pseudintermedius со 107 КОЕ/мл до 102 КОЕ/мл. Однако он был наименее эффективен против E. faecalis P37, у которого КОЕ/мл снизилось всего на один логарифм после восьми часов эксперимента. Тем не менее, ни один из штаммов индикаторных бактерий не рос после инкубации с L. plantarum/1 в течение 24 часов. Штаммы L. acidophilus /6 и L. lactis /9 также показали полное ингибирование роста индикаторных бактерий после 24 часов культивирования. Наименьший антагонистический эффект наблюдался для штамма L. acidophilus/3, хотя статистический анализ не выявил корреляции между специфическими штаммами молочнокислых бактерий и антагонистическими свойствами в отношении каких-либо индикаторных бактерий. Все результаты представлены на рис. 2.

Антагонистическое действие отобранных штаммов с пробиотическими свойствами на индикаторные бактерии (количественный метод)

Анализ адгезии был проведён для пяти штаммов молочнокислых бактерий, которые вызывали наибольшее подавление роста индикаторных бактерий в ходе полуколичественного исследования. Только Lactococcus raffinolactis /8 продемонстрировал слабую адгезию, тогда как остальные протестированные штаммы полностью не связывались с эпителиальными клетками Caco-2 (рис. 3 и табл. 4).

Примеры фотографий бактериальной адгезии

Воспалительные заболевания половых путей у сук – распространённая проблема в ветеринарной практике. Воспаление может привести к серьёзным проблемам со здоровьем, среди которых наиболее значимыми являются нарушения фертильности, резорбция и гибель эмбрионов, синдром эндометрита-пиометры и заболевания мочевыделительной системы. Большинство инфекций половых путей у сук имеют бактериальное происхождение, поскольку влагалище и матка – благоприятная среда для размножения бактерий.

Физиологическая микрофлора влагалища образована сапрофитными и условно-патогенными бактериями, большинство из которых являются аэробными, как описано в нашей предыдущей работе [2] и работах других авторов [1]. Наши предыдущие результаты [2] свидетельствуют о том, что количество и тип бактерий варьируют на разных стадиях эстрального цикла, а общее количество бактерий было значительно выше у здоровых собак в фазу проэструса/эструса и диэструса, чем в фазу анэструса, хотя не было выявлено существенных различий в количестве бактерий между здоровыми собаками и собаками с вагинитом. Более того, распространенность распространенных патогенов, таких как E. coli, S. pseudintermedius, S. canis и Enterococcus spp., была схожей у здоровых собак и собак с инфекциями половых путей. Однако проведенные к настоящему времени исследования не продемонстрировали, какая патологическая флора является физиологической, что побудило к поиску альтернативных методов лечения или профилактики бактериальных инфекций половых путей в эпоху растущей устойчивости собак к антибиотикам.

Исследования, проведённые на самках, показали, что их молочнокислые бактерии обладают антагонистическими свойствами в отношении патогенных бактерий и могут регулировать микрофлору урогенитального тракта [14,15,16]. Более того, известно, что пробиотики L. gasseri, L. brevis и L. acidophilus обладают высокой степенью адгезии к эпителиальным клеткам влагалища самок [17, 18]. Однако до настоящего времени ни одна пробиотическая бактерия не применялась для лечения инфекций половых путей у сук, и мы считаем, что определение таких бактерий имеет решающее значение для их использования для профилактики бактериальных воспалительных заболеваний.

Результаты исследования на агаровой пластинке показали, что молочнокислые бактерии, полученные от собак, обладают свойствами ингибирования роста в отношении вагинальных бактериальных патогенов, и что антагонистический эффект зависит от типа патогена. В целом, наибольшее ингибирование наблюдалось для E. coli и S. canis, а наименьшее для S. pseudintermedius. Между тем, самая сильная антибактериальная активность была обнаружена у видов L. acidophilus, L. plantarum, L. fermentum и Lactococcus raffinolactis. Эти результаты согласуются с данными Delucchi и соавторов [3], которые показали, что выбранные изоляты обладают антимикробной активностью в отношении патогенных бактерий. Более того, Fraga и соавторов [19] и Dec и соавторов [20] наблюдали более выраженный антибактериальный эффект лактобацилл курицы и кобылы против бактериальных патогенов in vitro.

Антимикробная активность в отношении распространённых вагинальных и мочевых патогенов может быть объяснена диффузными веществами, продуцируемыми этой группой бактерий [21, 22]. Все исследованные изоляты ингибировали рост in vitro как грамположительных, так и грамотрицательных патогенов, что позволяет предположить, что потенциальные пробиотические штаммы могут способствовать поддержанию баланса нормальной вагинальной микробиоты. В настоящее время пробиотики для животных всё чаще и с большим успехом применяются для лечения кишечных заболеваний у собак [23].

Адгезия к эпителию слизистой оболочки является важным свойством штамма, позволяющим считать его пробиотиком. В данном исследовании только Lactococcus raffinolactis продемонстрировал адгезию к ткани Caco-2. Отсутствие адгезии подтверждается исследованием, проведенным Хатчингсом и соавторами [6], в котором пероральный прием пробиотической добавки в течение двух или четырех недель не привел к увеличению распространенности вагинальных молочнокислых бактерий у собак. Поэтому, возможно, в таких случаях стоит рассмотреть вагинальное, а не пероральное введение пробиотиков.

Подводя итог, можно сказать, что данное исследование позволило отобрать штаммы молочнокислых бактерий, характеризующиеся антагонистическими свойствами по отношению к бактериальным патогенам, обусловленными продукцией ингибирующих рост соединений и адгезивными свойствами. Следовательно, их можно рассматривать для профилактического применения или в качестве альтернативы антибиотикотерапии инфекций у собак. Однако возможно, что выделенные из влагалища молочнокислые бактерии, такие как Enterococcus canintestini, могут чаще обеспечивать улучшенную колонизацию и адгезию, хотя это требует дальнейших исследований.

Данные и материалы могут быть предоставлены соответствующим автором по обоснованному запросу.

Хатчинс Р.Г., Ваден С.Л., Джейкоб М.Э., Харрис Т.Л., Боулз К.Д., Вуд М.В., Бейли К.С. Вагинальная микробиота стерилизованных собак с рецидивирующими инфекциями мочевыводящих путей или без них. J Vet Intern Med. 2014;28(2):300–4.

Статья CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Golińska E, Sowińska N, Tomusiak-Plebanek A, Szydło M, Witka N, Lenarczyk J, Strus M. Изменения микрофлоры влагалища на разных стадиях эстрального цикла у здоровых сук и сук с инфекциями половых путей. BMC Vet Res. 2021;17(1):8. https://doi.org/10.1186/s12917-020-02710-y.

Статья CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Delucchi L, Fraga M, Perelmuter K, Cidade E, Zunino P. Вагинальные молочнокислые бактерии у здоровых и больных сук и оценка пробиотической активности выбранных изолятов in vitro. Can Vet J. 2008;49(10):991–4.

PubMed PubMed Central Google Scholar

Жиро Э., Лелонг Б., Рэймбо М. (1991) Влияние pH и начальной концентрации лактата на рост Lactobacillus plantarum. Appl Microbiol Biotechnol. 1991;36:96–9.

Статья CAS Google Scholar

Рубен Р.К., Рой П.К., Саркар С.Л., Рубайет Уль Алам А.С.М., Джахид И.К. Характеристика и оценка молочнокислых бактерий из местного сырого молока на предмет потенциальных пробиотических свойств. J Dairy Sci. 2020;103(2):1223–1237. https://doi.org/10.3168/jds.2019-17092.

Хатчинс Р.Г., Бейли К.С., Джейкоб М.Э., Харрис Т.Л., Вуд М.В., Сакер К.Э., Ваден С.Л. Влияние перорального пробиотика, содержащего виды Lactobacillus, Bifidobacterium и Bacillus, на вагинальную микробиоту стерилизованных сук. J Vet Intern Med. 2013;27(6):1368–71.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Борис С., Суарес Х. Э., Васкес Ф., Барбес К. Адгезия вагинальных лактобацилл человека к вагинальным эпителиальным клеткам и взаимодействие с уропатогенами. Infect Immun. 1998;66(5):1985–9. https://doi.org/10.1128/IAI.66.5.1985-1989.1998.

Статья CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Mastromarino P, Brigidi P, Macchia S, Maggi L, Pirovano F, Trinchieri V, Conte U, Matteuzzi D. Характеристика и отбор штаммов вагинальных лактобацилл для приготовления вагинальных таблеток. J Appl Microbiol. 2002;93(5):884–93. https://doi.org/10.1046/j.1365-2672.2002.01759.x.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Сунгур Т., Аслим Б., Карааслан С., Актас Б. Влияние экзополисахаридов (ЭПС) штаммов Lactobacillus gasseri, выделенных из влагалища человека, на клетки рака шейки матки (HeLa). Анаэроб. 2017;47:137–44. https://doi.org/10.1016/j.anaerobe.2017.05.013.

Статья PubMed Google Scholar

Lee HJ, Park SY, Kim J. Мультиплексная ПЦР-детекция и идентификация видов Leuconostoc. FEMS Microbiol Lett. 2000;193(2):243–7. https://doi.org/10.1111/j.1574-6968.2000.tb09431.x.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Odamaki T, Yonezawa S, Kitahara M, Sugahara Y, Xiao JZ, Yaeshima T, Iwatsuki K, Ohkuma M. Новый набор праймеров для мультиплексной полимеразной цепной реакции для идентификации видов Lactococcus. Lett Appl Microbiol. 2011;52(5):491–6. https://doi.org/10.1111/j.1472-765X.2011.03028.x.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Струс М. Новый метод оценки антагонистического действия молочнокислых бактерий (МКБ) на отдельные патогенные индикаторные бактерии. Met Dośw Mikrobiol. 1998;50:123–30 [Статья на польском языке].

CAS Google Академия

Strus M, Pakosz K, Gościniak H, Przondo-Mordarska A, Rozynek E, Pituch H, Meisel-Mikolajczyk F, Heczko PB. Антагонистическая активность бактерий рода Lactobacillus по отношению к анаэробным и микроаэрофильным возбудителям инфекций пищеварительного тракта (Helicobacter pylori, Campylobacter coli, Campylobacter jejuni, Clostridium difficile). Med Dosw Microbiol. 2001;53(2):133–42. Польский. PMID: 11757422. [Статья на польском языке]

Гаспар С., Дондерс Г.Г., Палмейра-де-Оливейра Р. и др. Производство бактериоцина пробиотика Lactobacillus acidophilus KS400. АМБ Экспресс. 2018;8:153.

Статья CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Хансон Л., Вандевюссе Л., Жерме М. и др. Пробиотики для лечения и профилактики урогенитальных инфекций у женщин: систематический обзор. Журнал «J Midwifery Women's Heal». 2016;61:339–55.

Статья Google Scholar

Ходаи З., Мохаммад С., Гадериан Х. и др. Пробиотические бактерии и их супернатанты защищают клеточные линии энтероцитов от энтероинвазивной инвазии Escherichia coli (EIEC). Int J Mol Cell Med. 2017;6:183–9.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Мастромарино П., Маккиа С., Меггиорини Л. и др. Эффективность вагинальных таблеток, содержащих лактобактерии, при лечении симптоматического бактериального вагиноза. Clin Microbiol Infect. 2009;15:67–74.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Маклин IJNWR. Характеристика и отбор видов лактобацилл для повторной колонизации влагалища женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом. J Med Microbiol. 2000;49:543–52.

Статья PubMed Google Scholar

Фрага М., Перельмутер К., Делукки Л., Сидаде Э., Зунино П. Вагинальные молочнокислые бактерии кобыл: оценка пробиотического потенциала местных штаммов Lactobacillus spp. и Enterococcus spp. Антони Ван Левенгук. 2008;93(1–2):71–8. https://doi.org/10.1007/s10482-007-9180-4.

Дек М., Пухальски А., Новачек А., Верницки А. Антимикробная активность штаммов Lactobacillus куриного происхождения против бактериальных патогенов. Int Microbiol. 2016;19(1):57–67. https://doi.org/10.2436/20.1501.01.264.

Статья CAS PubMed Google Scholar

Рид Г. Научная основа пробиотических штаммов Lactobacillus. Appl Environ Microbiol. 1999;65(9):3763–6. https://doi.org/10.1128/AEM.65.9.3763-3766.1999.PMID:10473372.

Статья CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Алпай Б., Айдын Ф., Кили С., Кили А. Антимикробная активность и характеристики бактериоцинов, продуцируемых вагинальными лактобациллами. Turk J Med Sci. 2003;33:7–13.

Google Академия

Уайт Р., Атерли Т., Гард Б., Росси Г., Ван К., Мошер К., Уэбб К., Хилл С., Акерманн М., Скиабарра П., Алленспах К., Суходольски Дж., Йергенс А.Е. Рандомизированное контролируемое исследование влияния многоштаммового пробиотика на микробиоту слизистой оболочки при идиопатическом воспалительном заболевании кишечника у собак. Gut Microbes. 2017;8(5):451–66. https://doi.org/10.1080/19490976.2017.1334754.

Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Скачать ссылки

Непригодный.

Данное исследование было поддержано Центром ветеринарной медицины Университета Джамму и Ауэзской академии наук (грант № 9000844). Финансирующая организация не участвовала в разработке исследования, сборе, анализе и интерпретации данных, а также в написании рукописи.

Кафедра микробиологии, Медицинский колледж Ягеллонского университета, ул. Чиста, 18, кв. 31-121, Краков, Польша

Голиньска Эдита и Струс Магдалена

Отделение репродукции животных, Кафедра генетики и разведения животных, Факультет ветеринарной медицины и зоотехники, Познаньский университет естественных наук (PULS), ул. Войска Польского, 28, 60-637, Познань, Польша

Наталья Совинская

Ветеринарная клиника Бялы Кель, Białoruska 17a, 30-638, Краков, Польша

Шидло Марлена

Ветеринарная клиника Фелис, Дворцова 32, 32-620, Бжеще, Польша

Витка Наталия

Ветеринарная клиника Мультивет, Феликса Конечного 6/12U, 31-216, Краков, Польша

Ленарчик Джоанна

Университетский центр ветеринарной медицины Ягеллонского университета и Краковского сельскохозяйственного университета, Центр экспериментальной и инновационной медицины, Краковский сельскохозяйственный университет, Аллея Мицкевича 24/28, 30-059, Краков, Польша

Збигнев Арент

Поиск автора на: PubMed Google Scholar

EG (edyta.golinska@uj.edu.pl): исследование, курирование данных, формальный анализ, написание — первоначальный черновик, визуализация. NS (nmikolajewska@gmail.com): формальный анализ, курирование данных, ресурсы, написание — первоначальный черновик. MS (marlena.szydlo@gmail.com): курирование данных, исследование. NW (n.witka@gmail.com): курирование данных, исследование. JL (j.lenarczyk90@gmail.com): курирование данных, исследование. ZA (zbigniew.arent@urk.edu.pl): руководство, ресурсы. MS (magdalena.strus@uj.edu.pl): концептуализация, методология, ресурсы, написание — рецензирование и редактирование, руководство, администрирование проекта, привлечение финансирования. Все авторы прочитали и одобрили рукопись.

Переписка со Струс Магдаленой.

Второй местный Комитет по содержанию и использованию животных в Кракове счел этичное одобрение ненужным. Все эксперименты проводились в соответствии с действующими рекомендациями и правилами, а также с соблюдением рекомендаций ARRIVE (Исследования на животных: Отчетность об экспериментах in vivo). Сбор образцов у всех собак-самок, направленных в клинику, осуществлялся в соответствии с классической клинической практикой и с письменного согласия владельца.

Непригодный.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий к опубликованным картам и институциональной принадлежности.

Открытый доступ Эта статья лицензирована в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution 4.0 International, которая разрешает использование, обмен, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или в любом формате при условии указания автора(ов) и источника, ссылки на лицензию Creative Commons и указания внесенных изменений. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons статьи, если иное не указано в строке кредита на материал. Если материал не включен в лицензию Creative Commons статьи и предполагаемое использование не разрешено законодательным регулированием или выходит за рамки разрешенного использования, вам необходимо получить разрешение непосредственно у владельца авторских прав. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите сайт http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Отказ от передачи в общественное достояние Creative Commons (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) применяется к данным, предоставленным в этой статье, если иное не указано в строке кредита на данные.

Перепечатки и разрешения

Эдита, Г., Наталия, С., Марлена, С. и др. Влияние пробиотических бактерий на патогены гениталий у самок собак in vitro. BMC Vet Res 19, 82 (2023). https://doi.org/10.1186/s12917-023-03635-y

Скачать цитату

Получено: 23 сентября 2022 г.

Принято: 22 июня 2023 г.

Опубликовано: 8 июля 2023 г.

DOI: https://doi.org/10.1186/s12917-023-03635-y

Любой, с кем вы поделитесь следующей ссылкой, сможет прочитать этот контент:

Извините, в настоящее время ссылка для общего доступа к этой статье недоступна.

Предоставлено инициативой по обмену контентом Springer Nature SharedIt